Cartographie des interactions protéine-protéine et protéine-ADN au sein du complexe central méiotique

Dans les cellules méiotiques (lignée germinale), lors du brassage génétique, la cellule initie via un complexe protéique, la formation de cassures doubles brins d’ADN qui sont ensuite réparées grâce à un mécanisme basé sur la recombinaison homologue, utilisant le chromosome homologue comme matrice. Ces mécanismes sont responsables de la diversité génétique. La formation des cassures double brin est hautement régulée et fait appel à une dizaine de protéines organisés en complexes (RMM, MRX et le core complex). Spo11, endonucléase principalement impliquée dans la genèse des cassures doubles brins est une enzyme évoluée d’une topoisomérase de type 2, TopoVI avec qui (TopoVIA), il partage des similarités structurelles et fonctionnelles. Dans le but d’étudier le rôle des protéines du core complex méiotique dans les interactions protéine-protéine et protéine-ADN, ce travail a permis de tester des hypothèses élaborées sur base d’alignement de séquences et d’analyse de la structure Cryo-EM du core complex obtenue d’un laboratoire partenaire et permettant de déméler le mécanisme d’action du core complex méiotique sur l’ADN. Les résultats obtenus sont insuffisants pour confirmer ou infirmer les hypothèses énoncées. il reste cependant des expériences et résultats en attente de réalisation ou d’analyse pour obtenir une vue d’ensemble du mécanisme de formation des cassures doubles brins pendant la méiose. In meiotic cells (germline), during genetic mixing, the cell initiates, via a protein complex, the formation of DNA double-strand breaks which are then repaired by a mechanism based on homologous recombination, using the homologous chromosome as a template. These mechanisms are responsible for genetic diversity. The formation of double-strand breaks is highly regulated and involves about ten proteins organized in complexes (RMM, MRX and the core complex). Spo11, the endonuclease mainly involved in the genesis of double-strand breaks, is an enzyme evolved from a type 2 topoisomerase, TopoVI, with which it shares structural and functional similarities (TopoVIA). With the aim of studying the role of the proteins of the meiotic core complex in protein-protein and protein-DNA interactions, this work made it possible to test hypotheses developed on the basis of sequence alignment and analysis of the Cryo-EM structure of the core complex obtained from a partner laboratory and making it possible to unravel the mechanism of action of the meiotic core complex on DNA. The results obtained are insufficient to confirm or refute the stated hypotheses. However, there are still experiments and results awaiting completion or analysis to obtain an overview of the mechanism of double-strand break formation during meiosis.