Caractérisation du microenvironnement de la réaction ductulaire dans un foie chroniquement malade

Introduction et objectifs : Le foie est un organe vital aux multiples fonctions métaboliques. Lors d’une maladie chronique, les hépatocytes natifs perdent leur capacité de prolifération et rentrent dans un état de sénescence. À ce moment, les cellules progénitrices du foie, aussi appelées cellules ovales, OCs, prolifèrent et se différencient en nouveaux hépatocytes fonctionnels. Ce mécanisme est connu sous le nom de réaction ductulaire (DR). Cependant, la régénération médiée par la DR reste insuffisante pour éviter l’insuffisance hépatique. Afin de trouver un moyen d’amplifier ce mode de régénération, il est nécessaire de mieux comprendre le mécanisme en tant que tel. Dans ce but, nous avons cherché à caractériser le micro-environnement de la DR dans un foie chroniquement malade. Nous avons d’abord identifié les types cellulaires présents dans le micro-environnement de la DR. Ensuite, nous avons investigué l’expression de facteurs associés aux cellules sénescentes (SASPs). Enfin, nous avons étudié le rôle ainsi que caractérisé le phénotype et l’origine des liver sinusoidal endothelial cells, LSECs, dans la réaction ductulaire. Méthodes : Afin d’identifier les OCs et leur devenir, nous avons utilisé un modèle de souris transgénique Opn-iCreERT2; Rosa 26RYFP. Nous avons travaillé avec un modèle de souris transgénique Cdh5-iCreERT2; Rosa 26RmT/mG pour marquer les cellules endothéliales et identifier l’origine de LSECs. L’hépatopathie chronique a été induite par l’injection de CCl4 3x/semaines pendant 4, 6 et 8 semaines. Les tissus hépatiques ont été analysés par immunomarquage, cytométrie en flux et RT-qPCR. Résultats : Nous avons découvert que lors d’atteinte hépatique chronique, les LSECs était le type cellulaire majoritaire en contact des OCs. Nous avons identifié une baisse de l’expression de SASPs qui influence la capillarisation des LSECs. Nous avons localisé les LSECs capillarisées principalement en contact avec les OCs entourées de laminine, cette dernière est connue pour jouer un rôle répressif sur la différentiation des OC,s en hépatocytes. En étudiant le transcriptome des LSECs, nous avons démontré que les LSECs capillarisées ont une hausse de l’expression de tissue inhibitor of metalloproteases (TIMPs). Durant la capillarisation, les LSECs acquièrent un profils pro-fibrotique. Enfin, nous avons démontré qu’il n’y avait pas de recrutement de LSECs exogène dans l’atteinte chronique hépatique induite par CCl4. Conclusion : Lors d’atteinte chronique hépatique, les LSECs capillarisées contribuent au maintien du phénotype biliaire des OCs. Elles agissent en produisant plus de TIMPs pour inhiber les métalloprotéases responsables de la dégradation de la laminine. L’inversion de la capillarisation reste à explorer comme possible mécanisme afin d’améliorer la régénération médiée par la DR in vivo.