Modulation des activités de la chaperonine GroEL par sa liaison à CnoX

Maintenir l’homéostasie protéique cellulaire constitue un défi majeur pour les bactéries. Afin d'empêcher l'agrégation des polypeptides nouvellement synthétisés et de leur permettre d'acquérir rapidement leurs formes natives, les bactéries ont développé un réseau complexe de chaperons moléculaires. Parmi eux, GroEL est un chaperon moléculaire essentiel chez Escherichia coli, qui replie ses substrats via des cycles de liaison et de libération régulés par l'ATP. De façon unique, GroEL est capable de coopérer avec CnoX, une protéine faisant partie de la classe des chaperédoxines. L'objectif de mon mémoire était de répondre à la question suivante : "La liaison de CnoX à GroEL a-t-elle une influence sur les activités de GroEL ?". À ce propos, j’ai étudié les activités ATPase et de repliement de GroEL in vitro, avec ou sans interaction avec CnoX. La protéine GroEL a tout d'abord été purifiée afin d’en disposer d’une quantité suffisante pour pouvoir réaliser les expériences concernant l’activité ATPase et l’activité de repliement. Ensuite, l’activité ATPase de GroEL a été étudiée à l’aide d’un test enzymatique couplé. Finalement, l'activité de repliement de GroEL a été étudiée à l'aide d'un test mesurant la récupération de l'activité de la citrate synthase dénaturée.