Effets de la phosphorylation de la sérine 392 de p53 sur l'induction de la sénescence

Le suppresseur de tumeur p53 est une protéine centrale dans la régulation de nombreux voies cellulaires, en particulier celles qui concernent l’arrêt du cycle cellulaire et la mort cellulaire programmée par apoptose. En tant que facteur de transcription, une fois activé, p53 régule l’expression de divers gènes impliqués dans ces processus. De plus, suite à un stimulus apoptotique, p53 peut interagir directement avec certains membres de la famille de BCL-2, notamment BAX et BAK, afin d’induire la perméabilisation de la membrane mitochondriale externe, un événement considéré comme un point de non-retour dans le déroulement de l’apoptose. Dans environ 50 % des cancers humains, une mutation est détectée dans le gène codant pour p53, TP53. Les modifications post-traductionnelles (PTMs) jouent un rôle prépondérant dans la régulation de la stabilité et de l’activité de p53. Les recherches récentes du laboratoire ont investigué la fonction de la phosphorylation de la sérine 392 de p53 : un mutant de p53 non phosphorylable en sérine 392 présente un localisation mitochondriale déficiente et une capacité réduite d’induire l’apoptose. Nous montrons de plus dans ce mémoire que l’état phosphorylé ou non de la sérine 392 influe aussi sur la capacité du suppresseur de tumeur d’induire l’arrêt de la croissance et la sénescence. Nos travaux se basent sur l’utilisation de lignées exprimant de manière inductible (système Tet-On) p53 wt, p53 S392A (mutant non phosphorylable) et p53 S392E (mutant phospho-mimétique). Spécifiquement, l’absence de phosphorylation de la sérine 392 (p53 S392A) semble augmenter la capacité de p53 d’induire l’arrêt de la croissance (mesures de densité cellulaire par cytométrie en flux, essais de formation de colonie) ainsi que l’entrée en sénescence (analyses de la morphologie des cellules et de l’activité SA-β-galactosidase spécifique de l’état de sénescence). Dans un second temps, afin d’avoir une idée des mécanismes sous-jacents, nous avons réalisé une analyse par RT-qPCR de différents gènes cibles de p53 impliqués dans l’induction de l’arrêt de la croissance et la sénescence. Ces analyses suggèrent une meilleure induction de l’expression de p21, un inhibiteur de complexes cycline-CDK, par la version de p53 déphosphorylée en sérine 392 (p53 S392A). Ces analyses devront être poursuivies afin de pouvoir aboutir à des conclusions définitives quant à l’impact de la phosphorylation de la sérine 392 sur l’expressions des différents gènes.